遺伝子
プラスミドの設計・調製
ウイルスの設計・調製
組換え・変異体解析など
遺伝子領域における主な技術ラインナップ
プラスミドの設計・調製
siRNA耐性の変異体の作製、発現調整配列の導入などのカスタマイズに対応可能です。
使用目的に応じた精製レベルをご提案します。
「受託では困難」とご懸念の場合でも、ぜひお気軽にお問い合わせください。
受託サービスお問い合わせ遺伝子領域における主な事例紹介
プラスミドの設計・調製
強制発現・
調節性発現用
哺乳類細胞用遺伝子発現ベクタープラスミドの調製
ご指定いただいた遺伝子のアミノ酸コード領域をcDNAからPCR増幅し、N末端にMyc-tagを付加した状態で哺乳類用発現ベクタープラスミドに挿入する。挿入配列を確認後、Mini-prepサイズのプラスミドを提出する。
| 提出物 | 金額 | 期間 |
|---|---|---|
| プラスミド、プラスミド情報 | 130,000円~ | 1か月程度 |
出芽酵母内でのウイルスベクタープラスミドの構築
Nature 582: 561-565 (2020) の報告に基づき、出芽酵母内でDNA断片をつなぎ合わせ、感染力を欠失させたウイルスのゲノム (>20kb) をプラスミドとして構築する (ウイルスベクタープラスミド)。その後、酵母からDNAを抽出し、それを元に大腸菌を形質転換させ、ウイルスベクタープラスミドを抽出、精製する。
| 提出物 | 金額 | 期間 |
|---|---|---|
| プラスミド、報告書 | 1,200,000円 ~ | 3か月程度 |
ノックダウン用
(siRNA、shRNA)
遺伝子ノックダウン用shRNA/siRNA発現
レンチウイルス調製用プラスミドの構築
ご提供いただいた基本レンチウイルス調製用プラスミドにshRNA/siRNA配列を導入し、プラスミドを提出する。
| 提出物 | 金額 | 期間 |
|---|---|---|
| プラスミド、プラスミド情報 | 130,000円～ | 1か月程度 |
遺伝子編集用
(CRISPR/Cas9)
guide RNA/Cas9発現プラスミドの構築
ご指定いただいた遺伝子を機能不全にさせるように切断するguide RNAを3種類設計し、その切断効率を細胞を用いて評価する。最も切断効率の良かった guide RNA と Cas9 を発現するプラスミドを調製し、提出する。
| 提出物 | 金額 | 期間 |
|---|---|---|
| プラスミド、プラスミド情報 | 700,000円～ | 2か月程度 |
ウイルスの設計・調製
レンチウイルス/
レトロウイルス
遺伝子強制発現用レンチウイルスの調製
哺乳類細胞において発現させたい遺伝子をご指定いただき、目的用途に適したレンチウイルス調製プラスミドを設計・構築する。そのプラスミドを用いて、レンチウイルスを調製し、提出する。
| 提出物 | 金額 | 期間 |
|---|---|---|
| ウイルス、報告書 | 700,000円～ | 2か月程度 |
アデノ随伴
ウイルス
アデノ随伴ウイルスの調製
293系浮遊細胞 (30mL x 6) にアデノ随伴ウイルス調製用のプラスミドを導入し、72時間振盪培養後、培養細胞の細胞質からAAV粒子を回収する。qPCRによるAAVゲノム測定により、ウイルス量を算定する。
| 提出物 | 金額 | 期間 |
|---|---|---|
| ウイルス、報告書 | 1,200,000円～ | 1か月程度 |
アデノウイルス
遺伝子強制発現用アデノウイルスの調製
発現させたい遺伝子を元にアデノウイルス調製用コスミドを設計・構築する。このコスミドを用いてアデノウイルスを調製し、力価測定結果と共に提出する。
| 提出物 | 金額 | 期間 |
|---|---|---|
| ウイルス、報告書 | 1,800,000円～ | 2か月程度 |
組換え・変異体解析
サザンブロット
(non-RI)
サザンブロット解析
検出したいDNAについて、ヒアリングを行い、使用する制限酵素の選択および検出用プローブの設計を行う。ご提供いただいたDNAを制限酵素処理、電気泳動を行い、ナイロンメンブレンへと転写する。その後、作成したプローブをハイブリダイズさせ、non-RI (化学発光) で検出する。
| 提出物 | 金額 | 期間 |
|---|---|---|
| 報告書 | 400,000円 ~ | 1か月程度 |
ジェノタイピング
PCR
ノックアウトマウスの遺伝子型判定
ご提供いただいたノックインコンストラクトの情報に基づき、ノックアウトマウスの遺伝子型判定 (ジェノタイピング) 用のPCRプライマーを設計し、機能することを確認する。ご提供いただいた20匹分のマウス尾サンプルについて、設計したプライマーを使用したPCRを行い、ジェノタイピングを行う。
| 提出物 | 金額 | 期間 |
|---|---|---|
| 報告書 | 300,000円～ | 1か月程度 |
受託サービス
受託開発・コンサルティング
